ABSTRACT
La cruzipaína es la cisteína proteinasa principal del parásito causante de la enfermedad de Chagas, Trypanosoma cruzi. La enzima está codificada por un número grande de genes (hasta 130 en la cepa Tul2) dispuestos en tandem cabeza-cola, y ubicados en dos a cuatro cromosomas diferenes, según el clon o cepa del parásito. La expresión simultánea de varios genes diferentes lleva a la producción de una mezcla compleja de isoformas. Las isoformas englobadas en el término "cruzipaína 1" difieren esencialmente en el dominio C-terminal, en su secuencia de aminoácidos y en su patrón de N-glicosilación. Se ha determinado la presencia de una forma que difiere más marcadamente, particularmente en la región catalítica, la cruzipaína 2.
Subject(s)
Animals , Cysteine Proteases/genetics , Trypanosoma cruzi/enzymology , Amino Acid Sequence , Cysteine Proteases/metabolism , Genome, ProtozoanABSTRACT
The major cysteine proteinase from Trypanosoma cruzi, cruzipain, can be obtained essentially homogeneous, starting from crude epimastigote extracts, in one step, by affinity chromatography on Cystatin-Sepharose (specific for cysteine proteinases) or ConA-Sepharose (specific for high mannose N-linked glycoproteins). The methods offer considerable potential for enzyme purification from scarce sources, such as other parasite stages or radioactively labelled material with high specific radioactivity
Subject(s)
Animals , Cysteine Proteases/isolation & purification , Trypanosoma cruzi/enzymology , Chromatography, Affinity/methods , Concanavalin A , Cystatins , Cysteine Proteases/metabolism , SepharoseABSTRACT
Se tratan aspectos de la ultraestructura, composición química y metabolismo del Trypanosoma cruzi: rasgos estructurales más característicos - complejo cinetoplastomitocondria, núcleo, ribosomas, aparato de movimiento (mastigón)-; constitución antigénica del parásito; metabolismo de carbohidratos, lípidios, proteínas, aminoácidos e isoenzimas-; y, caracterización bioquímica de especies y cepas -mediante DNA cinetoplástico y perfil de proteínas